尿酸（UA）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)：BC1365
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑四：粉劑置于試劑瓶?jī)?nèi)玻璃管中。臨用前加入6 mL試劑一，充分混勻后備用；用不完的試劑-20℃分裝保存，避免反復(fù)凍融。-20℃可保存4周。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：2.5 µmol/mL 尿酸溶液。

3. 工作液A的配制：按照試劑二：試劑三：試劑四=250μL：750μL：500μL（10S）的比例配制，用于樣本測(cè)定管、空白管及標(biāo)準(zhǔn)管的檢測(cè)。根據(jù)樣本量現(xiàn)配現(xiàn)用，配后建議2小時(shí)內(nèi)用完（2-8℃或者冰上保存）。

4. 工作液B的配制：按照試劑二：試劑三：試劑一 =250μL：750μL：500μL（10S）的比例配制，用于樣本對(duì)照管的檢測(cè)。根據(jù)樣本量現(xiàn)配現(xiàn)用，配后建議2小時(shí)內(nèi)用完（2-8℃或者冰上保存）。

產(chǎn)品說(shuō)明：
尿酸為嘌呤代謝的終末產(chǎn)物，嘌呤代謝紊亂、能量代謝異常及腎臟對(duì)尿酸的排泄障礙等均可引起血漿尿酸水平升高或降低，進(jìn)而導(dǎo)致多種疾病如通風(fēng)、腎病、心血管疾病的發(fā)生，尿酸含量的測(cè)定在臨床診斷中有著重要的指導(dǎo)意義。
尿酸酶催化尿酸分解為尿*素、CO₂和H₂O₂，H₂O₂氧化亞鐵*中的Fe²⁺生成Fe³⁺，F(xiàn)e³⁺進(jìn)一步與4-氨基安*比林和酚反應(yīng)生成紅色醌類(lèi)化合物，在505nm處有特征吸收峰，通過(guò)測(cè)定505nm處的吸光值來(lái)計(jì)算尿酸的含量。


技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.00388 μmol/mL
線性范圍：0.003906-0.8 μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：


可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、蒸餾水、冰、EP管。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

1. 如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。

2、工作液A與工作液B，需根據(jù)樣本量現(xiàn)配現(xiàn)用，配后建議2小時(shí)內(nèi)用完（2-8℃或者冰上保存）。工作液為淡黃色溶液，如有變色，則視為失效，需重新配制。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g大鼠腎臟加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，離心取上清后按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.591-0.347=0.244，帶入標(biāo)曲y=1.7648x+0.0127，計(jì)算x=0.131，按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：

UA含量（μg/g質(zhì)量）=168x÷W=168×0.131÷0.1=220.08 μg/g 質(zhì)量。

1. 取鵝血清后按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.217-0.093=0.124，帶入標(biāo)曲y=1.7648x+0.0127，計(jì)算x=0.063，按液體體積計(jì)算含量得：

UA含量（μg/mL血清）=168x =168×0.063=10.584 μg/mL血清。
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