儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
單寧酶活性檢測(cè)試劑盒抗氧化
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Tannase Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號(hào)：BC4070-50T/24S

更新時(shí)間：2024-04-12

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1055

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測(cè) 總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測(cè) α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測(cè) 硫代葡萄糖苷含量檢測(cè) 生物堿含量檢測(cè) 總氧化狀態(tài)（TOS）檢測(cè) α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測(cè) 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測(cè) 水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測(cè) 植物銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測(cè)定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

單寧酶活性檢測(cè)試劑盒說明書
紫外分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC4070
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體75 mL×2瓶	2-8℃保存
試劑一	粉劑×2支	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑一：臨用前取1支加入1.5 mL無水乙醇混勻溶解，用不完的試劑可以2-8℃保存一周；
標(biāo)準(zhǔn)品：5 mg沒食子酸丙酯。臨用前加入1.178 mL無水乙醇充分混勻溶解，配成20 μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，2-8℃保存兩周。

產(chǎn)品說明：
單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(Tannase，EC 3.1.1.20)，存在于富含單寧的植物，也廣泛存在于微生物中，可以水解酯鍵和縮酚羧鍵，生成沒食子酸和葡萄糖。
使用沒食子酸丙酯（PG）作為單寧酶酶促反應(yīng)的底物，其在270nn下有特征吸收峰，根據(jù)其反應(yīng)前后吸光度的變化來計(jì)算單寧酶活力。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、超聲破碎儀、研缽/勻漿器、乙醇、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
1、組織：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液，冰浴勻漿。10000rpm，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、細(xì)胞或細(xì)菌樣本的制備：先收集細(xì)胞或細(xì)菌樣本到離心管內(nèi)，棄上清，按照每500萬細(xì)胞或細(xì)菌加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）。10000rpm，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟

紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min，波長(zhǎng)調(diào)至270nm，蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋：取10μL 20μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入3990μL提取液，充分混勻，配制成0.05μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實(shí)驗(yàn)中每管需要1000μL，為減小實(shí)驗(yàn)誤差，故配制大體積。）
對(duì)照管樣本處理：吸取0.1mL樣本于1.5mLEP管中作為對(duì)照管，沸水浴5min，冷卻至常溫待測(cè)。
加樣表（在1.5mLEP管中分別加入）

試劑名稱（μL）	測(cè)定管	對(duì)照管
提取液	850	850
試劑一	50	50
樣本	100	100（已滅活）
混勻，置于40℃水浴鍋中準(zhǔn)確反應(yīng)10min，立即沸水浴5min，冰浴冷卻至常溫。10000rpm，室溫離心10min，取上清液待測(cè)。
上清液	50	50
提取液	950	950
充分混勻后測(cè)定270nm下的吸光度，分別記為A測(cè)定、A對(duì)照，計(jì)算ΔA測(cè)定=A對(duì)照-A測(cè)定。另取1000μL標(biāo)準(zhǔn)液于石英比色皿中，測(cè)定270nm處的吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)1-2次。

注意事項(xiàng)：
如果A測(cè)定大于1.5，可以適當(dāng)加大稀釋倍數(shù)，保證總體積1mL不變，如20μL上清液和980μL提取液（相當(dāng)于F=1000/20=50），計(jì)算公式中需改變F和V上清液的數(shù)值。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1g玉蘭葉加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A對(duì)照-A測(cè)定=1.126-1.033=0.093，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：單寧酶（U/g質(zhì)量）=1000×ΔA÷A標(biāo)準(zhǔn)÷W=1000×0.093÷0.609÷0.1=1527.09U/g 質(zhì)量。