組織銅含量檢測試劑盒離子

產(chǎn)品簡介：

單位
盒
有效期
6個月
中文名稱
組織銅含量檢測試劑盒離子
儲存條件
2-8℃
英文名稱
Tissue Copper Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號：BC5560-50T/48S

更新時間：2024-04-23

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1955

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

組織銅（Cu）含量檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號：BC5560

規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	液體45 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體15 mL×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	液體1 mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 試劑一：若有試劑析出，置于37℃水浴溶解即可。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：10mmol/L（即10000µmol/L）硫酸銅標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：

銅（Cu）是人體必需的微量元素之一，也是蛋白質(zhì)以及酶的重要組成部分。可以存在于紅細(xì)胞的內(nèi)外，主要功能是輔助造血，即催化血紅蛋白的合成。銅元素可以適當(dāng)促進(jìn)人體的骨骼發(fā)育，促進(jìn)人體神經(jīng)系統(tǒng)以及腦部發(fā)育，維持嬰幼兒的正常生長發(fā)育，因此，測定組織內(nèi)銅離子含量可知體內(nèi)是否缺銅。

酸性條件下，Cu²⁺從銅藍(lán)蛋白和清蛋白中解離出來，與絡(luò)合劑3,5-二溴-PAESA反應(yīng)，產(chǎn)生紫色絡(luò)合物，在580nm處有特征吸收峰，在一定范圍內(nèi)吸光度與濃度成正比，從而計算出Cu²⁺濃度。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1︰5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL蒸餾水）進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心10min，取上清待測。

二、測定步驟

1、可見分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至580nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 80µmol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：取100µL 10mmol/L的標(biāo)準(zhǔn)液加入400μL 蒸餾水混勻，即2000µmol/L的標(biāo)準(zhǔn)品；再取40μL 2000µmol/L的標(biāo)準(zhǔn)品和960μL 蒸餾水混合，即配成80µmol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3、實驗前根據(jù)樣本量取部分試劑一37℃預(yù)熱10min。

4、操作表：（在1.5mLEP管中依次加入以下試劑）

試劑名稱（μL）	空白管	測定管	標(biāo)準(zhǔn)管
蒸餾水	50	-	-
樣本	-	50	-
標(biāo)準(zhǔn)品	-	-	50
試劑一	750	750	750
試劑二	250	250	250
充分混勻，37℃孵育5min，取反應(yīng)液于1mL玻璃比色皿中，立即測定580nm處吸光值A，記為A空白、A測定、A標(biāo)準(zhǔn)，計算ΔA測定=A測定-A空白，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白?？瞻坠?/span>和標(biāo)準(zhǔn)管只需測1-2次。

三、組織銅含量的計算

1. 按樣本質(zhì)量計算

銅含量（μmol/g）=ΔA測定÷（ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn)）×V提取÷W =0.08×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W

2. 按樣本蛋白濃度計算

銅含量（μmol/g prot）=ΔA測定÷（ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn)）×V提取÷（Cpr×V提取）=80×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr

C標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)品濃度，80µmol/L；V提取：前處理中蒸餾水體積，0.001L；W：樣本質(zhì)量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL。

注意事項：

1. 37℃孵育5min后請立即測定吸光度，若樣本數(shù)量過多，可分批次測定，盡量確保在20min內(nèi)完成測定。

2. 如果樣本測定吸光值大于0.5，建議將樣本用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測定，注意同步修改計算公式。

3. 如果樣本測定吸光值小于0.005或接近空白管吸光值，可適當(dāng)增大樣本量，空白管和標(biāo)準(zhǔn)管也需要進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整。

實驗實例：

1. 稱取0.1g鼠肺加入1mL蒸餾水進(jìn)行勻漿研磨，離心取上清后按照測定步驟操作，使用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A測定-A空白=0.126-0.071=0.055，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.384-0.071=0.313，按樣本質(zhì)量計算含量得：

組織銅含量（μmol/g）=0.08×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W =0.141μmol/g。

2. 稱取0.1010g杏仁加入1mL蒸餾水進(jìn)行勻漿研磨，離心取上清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA測定=A測定-A空白=0.267-0.071=0.196，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.384-0.071=0.313，按樣本質(zhì)量計算含量得：

組織銅含量（μmol/g）= 0.08×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W =0.496μmol/g。

3. 稱取0.1053g黃豆粉加入1mL蒸餾水進(jìn)行勻漿研磨，離心取上清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA測定=A測定-A空白=0.342-0.071=0.271，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.384-0.071=0.313，按樣本質(zhì)量計算含量得：