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產(chǎn)品中心
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產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法三羧酸循環(huán)系列BC2170線粒體檸檬酸（MCA）含量測試盒 三羧酸循環(huán)
產(chǎn)品型號(hào)：BC2170
更新時(shí)間：2022-08-07
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：2005
010-50973130
產(chǎn)品分類
線粒體檸檬酸（MCA）含量測試盒 三羧酸循環(huán)
線粒體檸檬酸（MCA）含量檢測試劑盒說明書 紫外分光光度法
注意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
貨號(hào)：BC2170
規(guī)格：25T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容：
酸性提取液：液體 25 mL×1 瓶，4℃保存。
堿性提取液：液體 25 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 7.5mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 2.5mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 7.5mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑 4℃保 存。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，10µmol/mL 檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。
產(chǎn)品說明： CA 是線粒體三羧酸循環(huán)的第1個(gè)中間產(chǎn)物，由檸檬酸合酶催化乙酰 CoA 與草酰乙酸合成，其 含量是三羧酸循環(huán)強(qiáng)度的主要指標(biāo)之一。 CA 在檸檬酸裂解酶的作用下，生成α-酮酸（草酰乙酸）；在弱酸性條件下，α-酮酸進(jìn)一步與苯 肼反應(yīng)，生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙；α-酮酸苯腙在 330nm 處有吸收峰，該波長下吸光度的變化程度可 反應(yīng)出 CA 的含量。
自備儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL 石英比色皿、研缽和蒸餾水。
操作步驟：
一、線粒體中檸檬酸提取：
1. 稱約 0.05-0.1g 組織（建議稱 0.1g 樣本），加入 0.5mL 酸性提取液，冰上充分研磨，600g/min 4℃ 離心 5min，取上清另一 EP 管中，11000g/min 4℃離心 10min，棄上清（取 300µL 該上清液和 300µL 堿性提取液中和后可用于細(xì)胞質(zhì) CA 含量測定）；
沉淀即線粒體，向沉淀中加入 0.5mL 酸 性提取液，充分懸浮溶解，超聲波破碎（功率 20%，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次），取此 溶液 300µL 和 300µL 堿性提取液中和，混勻，置冰上待測（不可用于蛋白質(zhì)含量測定）。
相關(guān)文獻(xiàn)：
《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影響因子:5.959 PMID:30850587
線粒體檸檬酸（MCA）含量測試盒 三羧酸循環(huán)
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