儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
3-磷酸甘油酸激酶（PGK）測(cè)試盒糖酵解
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Phosphoglycerate Kinase(PGK) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào)：BC2250-50T/48S

更新時(shí)間：2024-04-08

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：2191

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測(cè) 總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測(cè) α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測(cè) 硫代葡萄糖苷含量檢測(cè) 生物堿含量檢測(cè) 總氧化狀態(tài)（TOS）檢測(cè) α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測(cè) 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測(cè) 水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測(cè) 植物銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測(cè)定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

3-磷酸甘油酸激酶（PGK）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
紫外分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào)：BC2250
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體25 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1支	-20℃保存
試劑三	粉劑×1支	-20℃保存
試劑四	粉劑×1瓶	-20℃保存
試劑五	粉劑×3瓶	-20℃保存

溶液的配制：

試劑二：臨用前加入1mL蒸餾水充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存4周，禁止反復(fù)凍融
試劑三：臨用前加入2.5 mL 蒸餾水充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存4周，禁止反復(fù)凍融；
試劑四：臨用前加入3 mL 蒸餾水充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存4周，禁止反復(fù)凍融；
試劑五：提供一空棕色試劑瓶。臨用前取一支試劑五倒入空瓶中并加入10 mL 蒸餾水充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存2周，禁止反復(fù)凍融（該試劑為凍干試劑，可能存在肉眼觀察試劑量相差較大甚至量很少的現(xiàn)象，此現(xiàn)象不影響使用，實(shí)際質(zhì)量相同）；
工作液的配制：按照蒸餾水：試劑一：試劑二：試劑三：試劑四：試劑五=1.14mL：1.5mL：0.06 mL：0.15 mL：0.15 mL：0.6 mL（共3.6mL，4T）的比例配制，根據(jù)樣本量配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說(shuō)明：
3-磷酸甘油酸激酶（Phosphoglycerate Kinase，PGK，EC.2.7.2.3）是糖酵解的關(guān)鍵酶，也是生物得以生存的關(guān)鍵酶。廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi)，具有影響DNA復(fù)制和修補(bǔ)及刺激病毒RNA合成等生物學(xué)功能，廣泛應(yīng)用于藥物靶標(biāo)設(shè)計(jì)。

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產(chǎn)生1,3-二磷酸甘油酸和ADP，1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸，引起340nm處的吸光度下降，即反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、低溫臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

ΔA大于0.8或者A1測(cè)定小于0.9時(shí)，建議將粗酶液用提取液稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。當(dāng)ΔA小于0.01時(shí)，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（10min或15min）或增加樣本體積來(lái)測(cè)定。
空白管為檢測(cè)各試劑組分質(zhì)量的檢測(cè)孔，正常情況下，變化不超過0.01。
樣本的蛋白濃度需自行測(cè)定，由于提取液中含有一定濃度的蛋白（約1mg/mL），所以測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需扣除提取液自身蛋白濃度。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1g白菜加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后再用提取液稀釋4倍，之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定=1.126-0.654=0.472，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.916-0.914=0.002，ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.472-0.002=0.47，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：PGK（U/g 質(zhì)量）=321.54×ΔA÷W×稀釋倍數(shù)=321.54×0.47÷0.1×4=6044.952 U/g 質(zhì)量。
取0.1g小鼠肌肉加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后再用提取液稀釋20倍，之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算，ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定= 0.908-0.35=0.558，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.916-0.914=0.002，ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.558-0.002=0.556，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：PGK（U/g 質(zhì)量）=321.54×ΔA÷W×稀釋倍數(shù)=321.54×0.556÷0.1×20=35755. 248 U/g 質(zhì)量。
取駱駝血清樣本100uL按照測(cè)定步驟直接測(cè)定，測(cè)得計(jì)算，ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定= 0.966-0.907=0.059，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.916-0.914=0.002，ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.059-0.002=0.057，按液體體積計(jì)算酶活得：PGK（U/mL）=321.54×ΔA=321.54×0.057=18.328 U/mL。