組胺含量檢測試劑盒氧化

產(chǎn)品簡介：

儲存條件
2-8℃
有效期
6個月
中文名稱
組胺含量檢測試劑盒氧化
英文名稱
Histamine Content Assay kit
檢測方法
可見分光光度法
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品型號：BC5670-50T/24S

更新時間：2024-04-23

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1486

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

組胺含量檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號：BC5670

規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液一	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
提取液二	液體5 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體45 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×2支	2-8℃保存
試劑二稀釋液	液體5 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體12 mL×1瓶	2-8℃保存
粉劑一	粉劑3 g×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	液體1 mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前一支試劑二加入65μL蒸餾水溶解，2-8℃可保存4周。

2. 試劑二工作液的配制：根據(jù)樣本量按照試劑二：試劑二稀釋液=10μL：300μL（共310μL，約3S）的比例配制，現(xiàn)配現(xiàn)用。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品：10μmol/mL組胺標(biāo)準(zhǔn)液。

4. 0.1875μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)品配制：取75μL10μmol/mL組胺標(biāo)準(zhǔn)液，加入925mL蒸餾水，混勻配制成0.75μmol/mL的組胺標(biāo)準(zhǔn)品；再吸取250μL 0.75μmol/mL組胺和750 μL蒸餾水混合配制成0.1875μmol/mL的組胺標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

產(chǎn)品說明：

組胺（Histamine）是一種有潛在危害的含氮低分子量有機(jī)化合物，是由組*在脫羧酶的作用下產(chǎn)生的。當(dāng)組織受到損傷或發(fā)生炎癥和過敏反應(yīng)時，都可釋放組胺。組胺廣泛存在于各種食品中，攝入過量的組胺會對人體產(chǎn)生危害。組胺會被組胺脫氫酶（HDH）特異性分解，在1-mPMS作用下，電子轉(zhuǎn)移通過WST顯色，在470nm下有最大吸收峰，據(jù)此可以計算組胺含量。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液一體積（mL）為1：2.5~5的比例（建議稱取約0.2g，加入1mL提取液一）加入提取液一，冰浴勻漿后，于60℃水浴30min，冷卻至室溫后于4℃ 10000g離心10min，取0.8mL上清液，再緩慢加入0.15mL提取液二，緩慢吹打混勻至無氣泡產(chǎn)生，4℃ 10000g離心10min后取上清待測。

2. 紅酒等（酚類含量高）液體：稱取粉劑一0.05g，加入500μL液體樣本和500μL提取液一，冰浴勻漿后，于60℃水浴30min，冷卻至室溫后于4℃ 12000g離心10min，取0.8mL上清液，再緩慢加入0.15mL提取液二，緩慢吹打混勻至無氣泡產(chǎn)生，4℃ 10000g離心10min后取上清待測。

注：1、提取液二需緩慢加入，加入后會產(chǎn)生大量氣泡，建議使用2mL EP管進(jìn)行操作。

2、樣本提取后盡可能在2小時內(nèi)測定結(jié)束，若樣本量過多建議分批次處理。

3、含酚類高的樣本，前處理時加入粉劑一約0.05g，與樣本一起冰浴勻漿。如紅酒，前處理時取500μL液體樣本加入500μL提取液一，和粉劑一約0.05g（無需準(zhǔn)確稱量），之后按照液體樣本繼續(xù)進(jìn)行冰浴勻漿后等后續(xù)處理。

二、測定步驟

1、可見分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至470nm，蒸餾水調(diào)零。

2、試劑一37℃預(yù)熱15min。

3、操作表：（在1.5mLEP管中依次加入以下試劑）

試劑名稱（μL）	測定管	對照管	空白管	標(biāo)準(zhǔn)管
試劑一	650	750	650	650
試劑二工作液	100	-	100	100
試劑三	150	150	150	150
蒸餾水	-	-	100	-
樣本	100	100	-	-
標(biāo)準(zhǔn)品	-	-	-	100
充分混勻，37℃避光反應(yīng)15min，取反應(yīng)液于1mL玻璃比色皿中，測定470nm處吸光值A，記為A測定、A對照、A空白、A標(biāo)準(zhǔn)，計算ΔA測定=A測定-A對照，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白?？瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)管只需測1-2次。

三、組胺含量的計算

1. 按照蛋白濃度計算

組胺含量（μmol/mg prot）=ΔA測定×C標(biāo)準(zhǔn)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V樣本÷（V樣本×Cpr）×F

=0.1875×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×Cpr×F

C標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.1875μmol/mL；V樣本：加入的樣本體積，0.1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL，蛋白濃度需自行測定；F：稀釋倍數(shù)。

2. 按照樣本質(zhì)量計算

組胺含量（μmol/g 質(zhì)量）=ΔA測定×C標(biāo)準(zhǔn)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×（V上清+V提取液二）÷（W×V上清÷V提取液一）×F =0.223×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W×FC標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.1875μmol/mL；W：樣本質(zhì)量，g；V上清：提取時上清液體積，0.8mL；V提取液二：加入的提取液二體積，0.15mL；V提取液一：加入的提取液一體積，1mL；F：稀釋倍數(shù)。