LPS脂多糖 糖與碳水化合物

Lipopolysaccharides From Escherichia coli 055:B5

L8880 脂多糖產(chǎn)品進(jìn)口分裝的，脂多糖效價大于等于500000 EU每mg，但每批產(chǎn)品效價有一定差別，我們產(chǎn)品主要是提供脂多糖的活性，相關(guān)應(yīng)用方面的實驗需要客戶自己摸索和優(yōu)化。

說明：

①脂質(zhì)和多糖的復(fù)合物；②為革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分，脂多糖是內(nèi)毒素的重要群特異性抗原(O抗原)。脂多糖由三部分組成。脂質(zhì)A(Lipid A)為構(gòu)成內(nèi)毒素活性的糖脂，以共價鍵聯(lián)結(jié)到雜多糖鏈，有兩部分：一是核心多糖，在有關(guān)的株內(nèi)是恒定的；另一O特異性鏈(O-specific chain)是高度可變的。大腸桿菌的脂多糖在實驗室免疫學(xué)中是常用的B細(xì)胞促分裂因子即多克隆活化因子(polyclonal activator)?？捎糜诩?xì)胞培養(yǎng)。

簡介：

脂多糖，英文名稱Lipopolysaccharides，簡稱LPS，是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種*成分，位于細(xì)胞壁的外層并暴露于非莢膜細(xì)菌的細(xì)胞表面，有利于維持細(xì)胞外膜的完整性，保護(hù)細(xì)菌免受膽汁鹽和脂類抗生素的破壞。結(jié)構(gòu)上，脂多糖由類脂A、核心多糖和O-多糖側(cè)鏈組成。其中類脂質(zhì)A是構(gòu)成細(xì)菌內(nèi)毒素的主要成分，決定其毒性強弱；而O-多糖側(cè)鏈在不同細(xì)菌間是高度變化的，特異性決定細(xì)菌的血清型。
LPS可以引起免疫刺激的級聯(lián)反應(yīng)和機體的毒性病理生理活動，包括釋放內(nèi)毒素引起感染性休克從而導(dǎo)致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。正是LPS與機體免疫機能的密切關(guān)系，生命科學(xué)研究常常提取LPS進(jìn)行相關(guān)的研究，如闡明LPS的結(jié)構(gòu)，代謝，免疫學(xué)，生理學(xué)，毒性，生物合成途徑；誘導(dǎo)生長促進(jìn)因子如白介素的合成與分泌；誘導(dǎo)疾病研究的動物模型如炎癥反應(yīng)，急性肺損傷。將LPS分別與FITC、TRITC或2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBSA)反應(yīng)即可得到FITC、TRITC或TNP標(biāo)記的LPS，主要用于非胸腺依賴性B細(xì)胞對細(xì)菌LPS的免疫應(yīng)答研究。。
LPS可通過TCA、酚、酚-lv仿-石油mi等方法制備，其中后一種方法為粗提取法。TCA和酚提取得到的LPS在結(jié)構(gòu)上、電泳圖譜和內(nèi)毒素水平均較相似，不同之處在于含有的核酸和蛋白質(zhì)殘留量不同，TCA法得到的LPS含有約2%的RNA和10%的變性蛋白。酚法提取的LPS含有達(dá)60%的RNA和少于1%的蛋白。用凝膠過濾層析可除去酚提取LPS中的殘留蛋白，但是仍會留下約10-20%的核酸。進(jìn)一步用離子交換層析法純化可得到＜1%蛋白和＜1%RNA的LPS。

本品來源于血清型大腸桿菌O55:B5，用苯法提取而得。其內(nèi)毒素水平不少于500,000 EU (endotoxin units)/mg，經(jīng)分析，1ng相當(dāng)于0.5EU（鱟試劑法）和10EU（顯色法）。LPS O55:B5可用于刺激人腹腔巨噬細(xì)胞（1ng/ml）以及馬腹腔巨噬細(xì)胞的活動（1-100ng/ml）。

來源：Escherichia coli 055:B5

溶解性:可溶于水(10mg/ml)或細(xì)胞培養(yǎng)基(1mg/ml)，產(chǎn)生渾濁淡黃色溶液，溶于鹽溶液經(jīng)旋渦振蕩并加熱到70-80℃可得到一種濃度更高的LPS溶液（20mg/ml）。

使用方法：

1. LPS粉末是非無菌的，用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實驗需要過濾除菌，LPS儲存液的配置：將1mg LPS重懸于1ml無菌平衡鹽溶液或細(xì)胞培養(yǎng)基，輕輕旋渦振蕩直粉末*溶解，即得到1mg/ml的儲存液。此儲存液可進(jìn)一步用無菌平衡鹽或細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋需要的工作濃度。

2. LPS儲存液的保存：本儲存液（1mg/ml）可放在4℃保存，約一個月穩(wěn)定；也可分裝成單次用量后放到-20℃，2年穩(wěn)定。避免反復(fù)凍融。

【注意】：1）LPS溶液應(yīng)儲存于硅烷化容器內(nèi)，因為LPS可吸附于塑料或某些玻璃器皿，尤其當(dāng)其濃度＜0.1mg/ml時。但當(dāng)LPS濃度大于1mg/ml時，上述吸附則可忽略不計。2）如使用玻璃器皿，則需旋渦振蕩LPS溶液少30min，以重溶被吸附溶質(zhì)。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

參考文獻(xiàn)：

《MicroRNA-145 inhibits proliferation and promotes apoptosis of HepG2 cells by targeting ROCK1 through the ROCK1/NF-κB signaling pathway.》 作者:R.-K. Wang, X.-M. Shao, J.-P. Yang, H.-L. Yan, Y. Shao 期刊:European Review for Medical and Pharmacological Sciences 影響因子:2.721 PMID:31002128

《Role of TLR4 and miR‐155 in peripheral blood mononuclear cell‐mediated inflammatory reaction in coronary slow flow and coronary arteriosclerosis patients》 作者:Jiangyan Huang， Qin Yang， Longmiao He， Jun Huang 期刊:Journal of Clinical Laboratory Analysis 影響因子:1.728 PMID:28407320

《Luteolin suppresses lipopolysaccharide?induced cardiomyocyte hypertrophy and autophagy in vitro》 作者:Xing Li Jian Liu Jianfeng Wang Donghua Zhang 期刊:Molecular Medicine Reports   Pages: 1551-1560 影響因子:1.922 PMID:30628693

《miR-33 and RIP140 participate in LPS-induced acute lung injury》 作者:HUA LI, HUAN HOU, SHUANG LIU, YANGYANG FENG, WANSI ZHONG, XIAOJUAN HU, NIANLONG YAN 期刊:Turkish journal of medical sciences  影響因子:0.641 PMID:30761836

《Immunomodulatory activity of macromolecular polysaccharide isolated from Grifola frondosa》 作者:Xiao-Lei MA,MengMENG Li,RongHAN,ZhengLI,Xiao-HongCAO,Chun-LingWANG 期刊:Chinese journal of Natural Medicines 影響因子:1.991 PMID:26721709

《S?adenosyl methionine regulates calcium channels and inhibits uterine smooth muscle contraction in rats with infectious premature delivery through the transient receptor protein 3/protein kinase Cβ/C?kinase?activated protein phosphatase?1 inhibitor of 17 kDa signaling pathway》 作者:Jing Ge, Tao Han, Xiaoqiu Li, Lili Shan, Jinhuan Zhang, Yan Hong, Yanqiu Xia, Jun Wang, Mingxiao Hou 期刊:Experimental and Therapeutic Medicine 影響因子:1.41 PMID:29896230

《Improved Antitumor Efficacy of Combined Vaccine Based on the Induced HUVECs and DC-CT26 Against Colorectal Carcinoma》 作者:Qiushuang Zhang ,Chao Xie , Dongyu Wang ,Yi Yang, Hangfan Liu , Kangdong Liu , Jimin Zhao , Xinhuan Chen, Xiaoyan Zhang ,Wanjing Yang ,Xiang Li ,Fang Tian , Ziming Dong and Jing Lu 期刊:Cells 影響因子:5.656 PMID:30767782

《A novel polysaccharide from Craterellus cornucopioides enhances immunomodulatory activity on immunosuppressive mice models by regulation of TLR4-NF-κB pathway》 作者:Mingzhu Guo,  Meng Meng,  Chengcheng Feng,  Xu Wang  and  Chunling Wang 期刊:Food & Function 影響因子:3.241 PMID:

LPS脂多糖 糖與碳水化合物