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專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC2590-50T/24S
更新時間：2024-07-09
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：1454
010-50973130
產(chǎn)品分類
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中性木聚糖酶（NEX）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC2590
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 緩沖液 | 液體50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
標(biāo)準(zhǔn)品：10mg木糖。臨用前加入667μL蒸餾水配成100μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，2-8℃保存8周。
產(chǎn)品說明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中，中性木聚糖酶（NEX）一般分離自最適生長pH為6-8的微生物。
NEX在中性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在540nm處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過測定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率，可計算NEX活力。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
低溫離心機、可見分光光度計、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：
吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~1.2之間，否則加大樣本量或稀釋樣本，注意同步修改計算公式中的稀釋倍數(shù)。實驗實例：
取0.1193g藍(lán)莓加入1mL緩沖液進行勻漿研磨，取上清用蒸餾水稀釋40倍后按照測定步驟操作，用比色皿測得ΔA測定=A測定- A對照=0.497-0.458=0.039，帶入標(biāo)曲y=0.32x-0.1474（R2=0.9982），計算x=0.5825，按樣本質(zhì)量計算NEX活性得：
NEX活力（U/g 質(zhì)量）= x÷W÷30×F =0.5825÷0.1193÷30×40=6.510 U/g 質(zhì)量。
取泡菜汁離心取上清用蒸餾水稀釋2倍后按照測定步驟操作，用比色皿測得ΔA測定=A測定-A對照=0.474 -0.081=0.393，帶入標(biāo)曲y=0.32x-0.1474（R2=0.9982），計算x=1.689，按發(fā)酵液計算NEX活力得：
BAX活力（U/mL）= x÷T×F =1.689÷30×2=0.113U/mL。
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