血磷濃度檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào)：BC1655
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入1 mL蒸餾水溶解，再緩慢加272 μL濃硫酸，用不完的試劑2-8℃保存一周；

2. 試劑三：臨用前取1瓶加入5.5 mL蒸餾水充分溶解，再加入0.8 mL試劑二，充分混合，用不完的試劑2-8℃保存3天；

3. 標(biāo)準(zhǔn)液：10 mmol/L磷標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說(shuō)明：
血磷主要指血中的無(wú)機(jī)磷，以無(wú)機(jī)磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關(guān)系密切，在以mg/dL表示時(shí)，二者的乘積(［Ca］×［P］)為30～40。當(dāng)(［Ca］×［P］)>40，則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織；若(［Ca］×［P］)<35則妨礙骨的鈣化，甚至可使骨鹽溶解，影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對(duì)穩(wěn)定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對(duì)平衡。上述平衡受到維生素D3、甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調(diào)節(jié)。
去除血清中有機(jī)磷后，無(wú)機(jī)磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸，被硫*亞鐵還原后呈藍(lán)色，在660nm有光吸收；通過(guò)測(cè)定660nm吸光度，計(jì)算血液中磷含量。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0115 mmol/L
線性范圍：0.015625-5 mmol/L
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

血清預(yù)處理：吸取50μL血清，加950μL試劑一，混勻后8000rpm，室溫離心10min，取上清液，待測(cè)。
二、測(cè)定步驟

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至660nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋：取100μL 10 mmol/L無(wú)機(jī)磷，加入900μL蒸餾水，充分混勻，配制成1 mmol/L標(biāo)準(zhǔn)液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實(shí)驗(yàn)中每管需要50μL，為減小實(shí)驗(yàn)誤差，故配制大體積。）

3. 樣本測(cè)定：在1.5mLEP管或96孔板中依次加入以下試劑

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取鴨血清按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得A測(cè)定管=0.806，A空白管=0.056，A標(biāo)準(zhǔn)管=0.539，計(jì)算得：血磷含量（mmol/L）=20×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)=31.06 mmol/L。

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