全蛋白提取試劑盒（強(qiáng)）

用于哺乳動物組織和細(xì)胞中提取總蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑，作用較為強(qiáng)烈，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產(chǎn)品組成:
 

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

相關(guān)文獻(xiàn)：

《βelemene inhibits oxygen?induced retinal neovascularization via promoting miR?27a and reducing VEGF expression》 作者:Weilai Zhang Lei Chen Jin Geng Limin Liu Li Xu 期刊:Molecular Medicine Reports Pages: 2307-2316 影響因子:1.922 PMID:30664207
《Proanthocyanidins Protect against β-Hydroxybutyrate-Induced Oxidative Damage in Bovine Endometrial Cells》 作者:Xi Cheng,Shuhua Yang,Chuang Xu, Lanzhi Li,Yi Zhang, Yang Guo, Cai Zhang, Peng Li, Miao Long,Jianbin He 期刊:Molecules. 影響因子:3.098 PMID:30678309
《Luteoloside attenuates neuroinflammation in focal cerebral ischemia in rats via regulation of the PPARγ/Nrf2/NF-κB signaling pathway》 作者:Qiaoling Li,Zixia Tian,Minghui Wang,Jiejian Kou,Chunli Wang,Xuli Rong,Jing Li,Xinmei Xie,Xiaobin Pang 期刊:International Immunopharmacology 影響因子:3.361 PMID:30502652
《A new nanoscale transdermal drug delivery system: oil body-linked oleosin-hEGF improves skin regeneration to accelerate wound healing》 作者:Weidong Qiang,?Tingting Zhou,?Xinxin Lan,?Xiaomei Zhang,?Yongxin Guo,?Muhammad Noman,?Linna Du,?Jie Zheng,?Wenqing Li,?Haoyang Li,?Yubin Lu,?Hongyu Wang,?Lili Guan,?Linbo Zhang,?Xiaokun Li,?Jing Yang?&?Haiyan Li? 期刊:Journal of Nanobiotechnologyvolume  影響因子:5.345 PMID:30165861
《Actinidia chinensis planch polysaccharide protects against hypoxia?induced apoptosis of cardiomyocytes in vitro》 作者:Qiang Wang, Yunfa Xu, Ying Gao, Qi Wang 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:29750308
《The Expression Pattern of PLIN2 in Differentiated Adipocytes from Qinchuan Cattle Analysis of Its Protein Structure and Interaction with CGI-58》 作者:Peiwei Li , Yaning Wang , Le Zhang , Yue Ning  and Linsen Zan 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:29723991
《Cytotoxic Tricycloalternarene Compounds from Endophyte Alternaria sp. W-1 Associated with Laminaria japonica》 作者:Li Shen, Shu-Juan Tian , Hui-Liang Song , Xi Chen , Hao Guo, Dan Wan , Yu-Rou Wang , Feng-Wu Wang and Li-Jun Liu 期刊:Marine Drugs 影響因子:3.772 PMID:30360544
《Knockdown of BRCC3 exerts an anti?tumor effect on cervical cancer in vitro》 作者: Feifang Zhang， Qun Zhou 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:30272359
《Silencing of NOD2 protects against diabetic cardiomyopathy in a murine diabetes model》 作者: Lin Shen， Li Li， Man Li， Weiling Wang ，Wenbin Yin ，Wei Liu ，Yanyan Hu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30221681
《Egr-1 is involved in coronary microembolization-induced myocardial injury via Bim/Beclin-1 pathway-mediated autophagy inhibition and apoptosis activation》 作者:Xian-tao Wang, Xiao-dan Wu, Yuan-xi Lu,Yu-han Sun, Han-hua Zhu,Jia-bao Liang,Wen-kai He and Lang Li 期刊:Aging (Albany NY) 影響因子:5.515 PMID:30391937
《TAT-mGluR1 Attenuation of Neuronal Apoptosis through Prevention of MGluR1α Truncation after Experimental Subarachnoid Hemorrhage》 作者:Weiqi Wang,Ping Han,Rongxia Xie,Mingfeng Yang,Cheng Zhang,Qiongjie Mi,Baoliang Sun,Zongyong Zhang 期刊:ACS Chemical Neuroscience 影響因子:3.861 PMID:30339347
《Silencing of PYGB suppresses growth and promotes the apoptosis of prostate cancer cells via the NF?κB/Nrf2 signaling pathway》 作者: Zhen Wang, Gang Han, Qinghong Liu ,Wenyuan Zhang, Jinshan Wang 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:30106110
《PSMD7基因在人食管鱗癌組織中的表達(dá)及影響癌細(xì)胞增殖、凋亡的機(jī)制研究》 作者:張進(jìn)忠，石科，郭丹，楊亮，閆秀明 期刊:中國癌癥雜志 影響因子: PMID:
《The Toxic Effects of Aflatoxin B1 and Aflatoxin M2 on Kidney through Regulating L-Proline and Downstream Apoptosis》 作者:Huiying Li, Lei Xing, Muchen Zhang, Jiaqi Wang, and Nan Zheng 期刊:BioMed Research International 影響因子:2.197 PMID:
《Genistein attenuates di?(2?ethylhexyl) phthalate-induced testicular injuries via activation of Nrf2/HO?1 following prepubertal exposure》 作者: Liandong Zhang, Hecheng Li, Ming Gao, Tongdian Zhang, Zhizhong Wu, Ziming Wang, Tie Chong 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:29328408
《Rosuvastatin relieves myocardial ischemia/reperfusion injury by upregulating PPAR?γ and UCP2》 作者:Ling Wang Rong Lin Langtao Guo Meiman Hong 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:29845235
《Liver-specific deletion of TSHR inhibits hepatic lipid accumulation in mice》 作者:Lingyan Zhou，Kunpeng Wu，Liya Zhang，Ling Gao，Shihong Chen 期刊:Biochemical and Biophysical Research Communications 影響因子:2.705 PMID:29421660
《Bta-miR-130a/b regulates preadipocyte differentiation by targeting PPARG and CYP2U1 in beef cattle》 作者:Xueyao Ma，Dawei Wei，Gong Cheng，Shijun Li，Li Wang，Yaning Wang，Xiaoyu Wang，Song Zhang，Hongbao Wang，Linsen Zan 期刊:Molecular and Cellular Probes 影響因子:2.511 PMID:30336279
《Insertion of 275-bp SINE into first intron of PDIA4 gene is associated with litter size in Xiang pigs》 作者:Chang Liu，Xueqin Ran，Xi Niu，Sheng Lia，Jiafu Wang，Qin Zhang 期刊:Animal Reproduction Science 影響因子:1.817 PMID:29728275
《The growth and pluripotency of mesenchymal stem cell on the biodegradable polyurethane synthesized with ferric catalyst》 作者:Qianqian Wei, Jiachang Jin, Xinyuan Wang, Qijun Shen, Mi Zhou, Shizhong Bu & Yabin Zhu 期刊:Journal of Biomaterials Science, Polymer Edition 影響因子:2.121 PMID:29478369
《MiR-144-3p promotes the tumor growth and metastasis of papillary thyroid carcinoma by targeting paired box gene 8》 作者:Chang Liu, Chang Su, Yanchun Chen & Guang Li  期刊:Cancer Cell International 影響因子:23.916 PMID:
《The promotion on cell growth of androgen-dependent prostate cancer by antimony via mimicking androgen activity》 作者:Changwen Zhang，Penghao Li，Yingwu Wen，Guowei Feng，Yu Liu，Yangyi Zhang，Yong Xua，Zhihong Zhang 期刊:Toxicology Letters 影響因子:3.499 PMID:29462692
 

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